泰國(guó)公司沙門(mén)氏菌診斷血清60種套裝

泰國(guó)S&A沙門(mén)氏菌診斷血清套裝

泰國(guó)公司沙門(mén)氏菌診斷血清60種套裝

試驗(yàn)方法

O抗原檢測(cè)步驟

       將沙門(mén)氏菌接種到非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上，35-37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。

1. 滴一滴生理鹽水（0.85%氯化鈉）于潔凈載玻片上作為對(duì)照。從非選擇性瓊脂培養(yǎng)基平板上取一滿環(huán)培養(yǎng)物與載玻片上生理鹽水混合。30S內(nèi)凝集表明是粗糙型菌株。該菌株不能用于血清學(xué)分型。如果不凝集繼續(xù)進(jìn)行血清學(xué)分型并記錄。
2. 滴一滴沙門(mén)氏菌抗血清于潔凈載玻片的測(cè)試區(qū)域。從非選擇性瓊脂培養(yǎng)基平板上取一滿環(huán)培養(yǎng)物于抗血清上。將培養(yǎng)物與抗血清充分混合，輕輕晃動(dòng)載玻片1分鐘。如果凝集表明菌株含有這種抗血清中特定的一種O抗原。

說(shuō)明：

        首先用O多價(jià)血清進(jìn)行凝集，如果菌株與O多價(jià)血清發(fā)生凝集，則繼續(xù)使用O多價(jià)血清中包含的相應(yīng)的群血清進(jìn)行測(cè)定。如果菌株與某一O群血清發(fā)生凝集，則繼續(xù)使用該群包含的單因子抗血清進(jìn)行測(cè)試。

Vi抗原檢測(cè)步驟

       一些傷寒沙門(mén)氏菌、丙型副傷寒沙門(mén)氏菌和都柏林沙門(mén)氏菌可能出現(xiàn)與O抗血清不凝集，必須使用Vi抗血清進(jìn)行測(cè)定。從營(yíng)養(yǎng)瓊脂（NA）、胰胨大豆瓊脂（TSA）或三糖鐵瓊脂（TSI）上挑取新鮮培養(yǎng)物進(jìn)行Vi抗血清測(cè)定。如果試驗(yàn)結(jié)果顯示此培養(yǎng)物能與Vi抗血清發(fā)生凝集反應(yīng)而不能與O抗血清發(fā)生凝集反應(yīng)，則取兩環(huán)培養(yǎng)物懸浮于1mL普通生理鹽水中（NSS0.85%），100℃沸水浴15-60分鐘以破壞Vi抗原。取沉淀物用O抗血清重新進(jìn)行玻片凝集試驗(yàn)，應(yīng)該是顯示陽(yáng)性結(jié)果。

H抗原檢測(cè)步驟（Sven Gard技術(shù)）

       挑取非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上的培養(yǎng)物一環(huán)點(diǎn)種于Swarm Agar平板中間，35-37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。有動(dòng)力的菌株在Swarm Agar平板表面蔓延生長(zhǎng)。

1. 分別滴一滴生理鹽水和一滴H抗血清于載玻片的兩個(gè)測(cè)試區(qū)域。
2. 用接種環(huán)從Swarm Agar點(diǎn)種區(qū)邊緣挑取培養(yǎng)物，分別與生理鹽水和H抗血清充分混合。
3. 輕微搖動(dòng)載玻片30s至1min，觀察反應(yīng)結(jié)果，菌株不應(yīng)與生理鹽水凝集。
4. 應(yīng)先依次使用H多價(jià)抗血清進(jìn)行測(cè)定。

對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的解釋

于1分鐘內(nèi)呈明顯凝集者為陽(yáng)性，呈均勻乳白色混濁者為陰性。

注意事項(xiàng)

1. 被檢菌應(yīng)首先用O多價(jià)血清及O因子血清鑒定其O抗原，在必要時(shí)以Vi血清鑒定其Vi抗原，然后以H血清鑒定其鞭毛抗原，參考沙門(mén)氏菌屬診斷抗原表，并根據(jù)生化反應(yīng)特性，做出菌型診斷。
2. 生化反應(yīng)符合沙門(mén)氏菌定義，但與O多價(jià)血清不凝集或用本組血清不能定型的菌株，可送往有條件定型的機(jī)構(gòu)，做出菌型鑒定。
3. 血清已用生理氯化鈉溶液稀釋，使用時(shí)不必再做稀釋。
4. 防止凍結(jié)，在有效期內(nèi)使用。

包裝和規(guī)格

紙盒包裝，每盒60種，共計(jì)60瓶（多價(jià)血清2Ml/瓶，單因子血清1Ml/瓶）。

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一種菌體有一種或多種不同的O抗原。沙門(mén)氏菌的O抗原共有65種，以阿拉伯?dāng)?shù)字1、2、3……表示。主要抗原：O抗原為某一菌群*而其他菌群不具有。如：2、3、4、7、8、9、10等。次要抗原：O抗原為幾個(gè)菌群共有。如：1、5、6、12等。 H抗原存在于鞭毛之中，為蛋白質(zhì)，由肽鏈中氨基酸的排列順序及空間構(gòu)型決定其特異性。不耐熱，經(jīng)加熱和用乙醇及堿處理易變性。