細(xì)菌性腸胃炎菌屬9聯(lián)PCR熒光檢測試劑盒

PCR核酸試劑 細(xì)菌性腸胃炎菌屬9聯(lián)PCR熒光檢測試劑盒

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兩管多重用于檢測和量化沙門氏菌屬，志賀氏菌屬，小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌，艱難梭菌，結(jié)腸彎曲桿菌/空腸彎曲菌/紅嘴鷗彎曲桿菌，產(chǎn)vero毒素大腸桿菌和內(nèi)部對照。
Two tube multiplex for detection AND quantification of Salmonella spp., Shigella spp., Yersinia enterocolitica, Clostridium difficile, Campylobacter coli/jejuni/lari, VTEC and internal control.

PCR核酸試劑 細(xì)菌性腸胃炎菌屬9聯(lián)PCR熒光檢測試劑盒

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PCR核酸試劑

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（三）葡聚糖凝膠G-50柱層析法 
除游離熒光素可用2×46cm柱層析法，詳細(xì)方法參閱第二章。加入熒光抗體15～18ml（按床體積的5%～10%加樣），使其緩慢滲入柱內(nèi)，待即將全部入柱時，加入PBS少許，關(guān)閉下口，停留30～40min ，使游離熒光充分進入細(xì)篩孔中，然后再接通洗脫瓶開始滴入洗脫液。加入洗脫液一定量后，熒光抗體即向下移行，逐漸與存留于上端的游離熒光素之間拉開明顯的界線，隨著大量洗脫液的不斷加入，二者分離距離越來越大，熒光抗體zui先流出，分前、中、后三部分收集，測F/P比值，合格者合并，濃縮，分裝。洗脫液用20%磺基水楊酸測定蛋白（發(fā)生沉淀反應(yīng)），繼續(xù)洗脫，游離熒光素則相繼被洗脫下來，至洗脫液中無蛋白和熒光素后，此層析柱即可再用。 
若用以除去熒光抗體中的游離熒光素和硫酸銨等鹽類，可先在過柱前透析一夜，否則，NH4+太濃，在蛋白未*洗脫時即出現(xiàn)NH4+，因而影響提純與回收蛋白，一般待洗脫液出現(xiàn)蛋白時，即進行收集，之后出現(xiàn)SO4++（用1%BaCl2檢查發(fā)生白色沉淀）。zui后是NH4+，（用納氏試劑檢查呈黃棕色沉淀），待洗脫液無SO4++及NH4+后可再用。 
如僅用小量熒光抗體，可用1×20cm的柱層析柱，取2g Sephadex G-50裝柱，即可過濾2～3.5ml熒光抗體。 
（四）DEAE纖維素柱層析法 
標(biāo)記過多或過少熒光素的抗體分子可用DEAE-纖維素柱層析法除去。方法如下： DEAE-纖維素柱的裝柱，洗脫、再生方法等與提純IgG方法相同。裝柱所需DEAE-纖維素量以干重每克交換20～50mg標(biāo)記蛋白量為宜 。
常用梯度洗脫法如下： 
（1）層析柱用0.01mol/L、pH7.2PB平衡，標(biāo)記物上柱后，先用0.01mol/L、pH7.2PB洗脫，洗出無色或淡綠色液體，洗脫液量（根據(jù)床體積大小每梯度乘3），然后依下列各種離子強度洗脫液， 分別洗脫和收集： 
0.01mol/L、pH7.2PBS（0.05mol/L NaCl）……洗脫部分1。 
0.01mol/L、pH7.2PBS（0.01mol/L NaCl）……洗脫部分2。 
0.01mol/L、pH7.2PBS（0.02mol/L NaCl）……洗脫部分3。 
將此三部分收集液（每管5ml）分別測定其F/P比值，0.05mol/L NaCl pH7.2PB洗脫液280nm光密度高峰管合并，濃縮保存?zhèn)溆?。因這部分非特異性染色熒光zui少，是比較好的熒光抗體。其他兩部分可以廢棄。