羊抗人IgG血清說(shuō)明書(shū)

羊抗人IgG血清

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名   稱(chēng)：羊抗人IgG

濃   度：  1mg/1ml
抗體來(lái)源（宿主）：兔源多抗、鼠源
克  隆：?jiǎn)慰寺】贵w、多克隆抗體
適  用：Human, Mouse, Rat, Chicken
抗體類(lèi)型：一抗  
研究領(lǐng)域:細(xì)胞生物、神經(jīng)生物學(xué)等
性    狀：凍干粉或液體
保  存： Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature foR   At least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable foR   At least two weeks at 2-4 °C.

相關(guān)標(biāo)記：FITC、Gold 、HRP、PE   PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5 、PE-CY7 、RBITC 、  Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488 、 Alexa Fluor 555 、Alexa Fluor 647、AP 、APC  、Biotin 、Cy3 、Cy5 、Cy5.5 、Cy7 。
儲(chǔ) 存 液： Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4 or PBS with 0.1% sodium azide and 50% glycerol pH 7.3. -20oC, Avoid freeze / thaw cycles.
羊抗人IgG優(yōu)質(zhì)供應(yīng)，相關(guān)抗體：
JL-1800R   Anti-PACAP-38抗體,腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體
JL-1801R   Anti-GFRα-1/GDNF抗體,GDNF家族受體α-1抗體
JL-1802R   Anti-ET-1抗體,內(nèi)皮素-1抗體
JL-1803R   Anti-ACEI|血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體
JL-1805R   Anti-GHRF/GHRH抗體,生長(zhǎng)激素釋放激素因抗體
JL-1806R   Anti-TSHR 抗體,促甲狀腺素受體抗體（C端）
JL-1808R   Anti-GLP-2抗體,胰高血糖素樣肽-2抗體
JL-1810R   Anti-Tubulin-β抗體,微管蛋白
JL-1811R   Anti-Shank1抗體,shank-1抗體
JL-1812R   Anti-HEV抗體,戊型肝炎病毒抗體
JL-1813R   Anti-HCV-NS4a抗體,丙型肝炎病毒-NS4a抗體
JL-1814R   Anti-ICAD/DFF-45β抗體,Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體
JL-1815R   Anti-FAS/Apo-1/CD95抗體,載脂蛋白A1抗體
JL-1816R   Anti-FasL抗體,FasL抗體
JL-1817R   Anti-BFGF/FGF-2抗體,堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體
JL-1818R   Anti-HCV-NS1抗體,丙型肝炎病毒-NS1抗體
JL-1819R   Anti-HCV-NS3抗體,丙型肝炎病毒-NS3抗體                                                                          

JL-1820R   Anti-CT-R抗體價(jià)格好，降鈣素受體抗體                                                                       

JL-17001   胰蛋白胨大豆肉湯    250 85 用于金黃色葡萄球菌的MPN測(cè)定，增菌培養(yǎng)，NaCl濃度可根據(jù)需要而調(diào)整（GB、SN標(biāo)準(zhǔn)）

 Trypticase （Tryptic） Soy Broth      
JL-17002   Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)     250 225 用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)（GB、SN標(biāo)準(zhǔn)）   
 Baird-ParkeR   Agar Base      
JL-17003   亞碲酸鹽卵黃增菌液  5ml*10 65 加入Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)中   
 Egg-Yolk lurite Emulsion      
JL-17004   兔血漿   0.5ml*20 130 用于金黃色葡萄球菌凝固酶試驗(yàn)   
 Rabbit  Plasma      
JL-17005   DNA酶瓊脂    100 360 用于核糖核酸酶檢測(cè)   
單克隆抗體制備方法： （一）雜交瘤細(xì)胞的大量繁殖
克隆化的細(xì)胞可以在體外進(jìn)行大量培養(yǎng)，收集上清液而獲得大量的單一的克隆化抗體。不過(guò)體外培養(yǎng)法得到的單克隆抗體有限，其不能超過(guò)特定的細(xì)胞濃度，且每天要換培養(yǎng)液。而體內(nèi)雜交瘤細(xì)胞繁殖可以克服這些限制。雜交瘤細(xì)胞具有從親代淋巴細(xì)胞得來(lái)的腫瘤細(xì)胞的遺傳特性。如接種到組織相容性的同系小鼠或不能排斥雜交瘤的小鼠（無(wú)胸腺的裸鼠），雜交瘤細(xì)胞就開(kāi)始無(wú)限地繁殖，直至宿主死亡。產(chǎn)生腫瘤細(xì)胞的小鼠腹水和血清中含有大量的雜交瘤細(xì)胞分泌的單克隆抗體，這種抗體的效價(jià)往往高于培養(yǎng)細(xì)胞上清液的100~1 000倍。
利用免疫抑制劑，如降植烷、液體石蠟、抗淋巴細(xì)胞血清等，可以加速和促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)。
1．材料
　?。?/span>1）經(jīng)高壓滅菌的降植烷。
　?。?/span>2）Balb/c鼠：5~8周齡。
（3）雜交瘤細(xì)胞：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞。
（4）RPMI—1640培養(yǎng)液
（5）新生牛血清
2．操作方法
　　（1） 于小鼠腹腔注射0.5ml降植烷，注射后１～９周內(nèi)種植細(xì)胞。
　?。?/span>2） 收取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的雜交瘤細(xì)胞，用５％FCS—1640液洗滌一次，1 000r/min離心10min。
（3） 取樣，用臺(tái)盼蘭染色，計(jì)活細(xì)胞數(shù)，重新用５％FCS—1640液配成1.0×107細(xì)胞/ml的懸液。
（4） 給注射了降植烷的小白鼠接種雜交瘤細(xì)胞，每只腹腔注射1ml（含1.0×107個(gè)細(xì)胞/ml）。
（5） 接種后10天左右時(shí)間腫瘤體積zui大，此時(shí)可由腹腔抽取腹水，每隔1~3天取1次，可取10次。血清可由腋下動(dòng)脈或心臟采血后分離。
（二）單克隆抗體的提純
1．材料
（1） 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液
20 mMol/L NaCl
（2） 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液
40mMol/L NaCl
（3） 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液
80 mMol/L NaCl
（4） 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液
（5） 飽和硫酸銨液
（6） DEAE—纖維素柱
2．操作方法
（1）小鼠腹水用冷PBS液稀釋4倍后，于1.00×105轉(zhuǎn)離心30min，去沉淀。
（2）在4℃于上清中緩緩滴加飽和硫酸銨液，邊加邊攪拌，使溶液zui終為50％硫酸銨濃度。
（3）此溶液置冰中30min~60min，然后5 000r/min離心10min，去上清。
（4）將沉淀溶于Tris－HCl緩沖液（40mMol/L NaCl）中（溶液可能混濁）。
（5）裝入透析袋于Tris－HCl緩沖液（20 mMol/L NaCl）中透析除鹽。
（6）離心去沉淀。
（7）溶液稀釋?zhuān)?/span>1:100或更高倍稀釋?zhuān)┖?，?/span>280nm測(cè)蛋白含量，估計(jì)蛋白質(zhì)含量
1A 280unit=0.8mg蛋白質(zhì)
一般每ml腹水中，含有總蛋白約25mg~36mg。
（8）過(guò)DEAE—纖維素柱：纖維素柱高40cm，以20mMol/L NaCl Tris緩沖液平衡。透析樣品以Tris緩沖液等量稀釋。
樣品進(jìn)入柱床速度為1ml~2ml/min，以NaCl線形梯度洗脫。大部分單克隆IgG于40 mMol/L和80mMol/L NaCl洗脫，也有極少例外的單克隆抗體于120 mMol/L ~150 mMol/L NaCl洗脫。
測(cè)OD280nm收集蛋白峰，單克隆IgG保存?zhèn)溆谩?/span>
雜交瘤產(chǎn)生各種免疫球蛋白，但主要是IgG和IgM，究竟是哪種為主，則決定于抗原的免疫程序。免疫一次，且3天后就取脾，多為產(chǎn)生IgM的B淋巴細(xì)胞。免疫多次的多為IgG。